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1、InnovationTM 蛋白质(多肽)高效反相液相色谱柱

蛋白质(多肽)高效反相色谱产品主要应用于:

1. 肽图谱:  以300Å C18为代表的大孔高效反相液相色谱柱在过去数十年来一直被用作生物化学中的肽图谱(peptide mapping)。蛋白质组学中的二维肽图谱指的也是高效反相和高效阳离子交换。

2. 多肽纯化: 大孔高效反相液相色谱柱迄今为止仍然是多肽合成后纯化肽最有效的方法。许多天然多肽的分离纯化也主要依靠大孔高效反相液相色谱柱。

3. 生物制药的质量控制: 以蛋白质为代表的生物制药是一个比小分子制药复杂许多的过程。每一步进程和最终产品的质量控制不能离开蛋白质(多肽)高效反相色谱产品。

4. 蛋白质纯化: 在许多人的常识中, 有机溶剂可能会导致蛋白质变性。但在自然界的许多蛋白质或基因工程化的许多蛋白质, 例如, 应用于有机催化的酶, 绿色化学的酶, 极端环境下生长的微生物或生物中的蛋白质成分, 在有机溶剂中保持其活性。另外,  许多蛋白质能从300Å C5或300Å C1大孔高效反相液相色谱柱上不超过30%乙腈洗脱而且保持其活性。在这种情况下,制备规模的大孔高效反相液相色谱分离纯化实际上代表的是最佳选择, 特别是时间和生产成本。

InnovationTM 300Å C18通过成熟的超临界流体封端技术, 最大程度了消除硅醇基的酸性效应, 因此变成"名符其实"高品质的纯粹反相机理的高效液相色谱柱。

 

2、InnovationTM 蛋白质(多肽)高效强阳离子交换液相色谱柱

 

    基因工程药物生产成本的70%甚至更高来自蛋白质药的分离纯化。大规模蛋白质药的分离纯化通常使用2-4步纯化过程, 色谱模式包括离子交换, 亲合,凝胶体积排阻和疏水。离子交换液相色谱是其中最常见最可靠最有用的一种色谱模式。

    蛋白质和多肽分析经常使用高效强阳离子交换液相色谱柱。蛋白质组学中的二维肽图谱指的是高效反相和高效阳离子交换。

    然而, 大规模蛋白质药的分离纯化通常使用的是低压(柱效几百)或中压(FPLC, 柱效1-3千)软胶, 高效阳离子交换通常使用的是聚合物基质的高效离子交换键合相(柱效1-4万)。相比之下, 硅胶基质的高效离子交换键合相(柱效8-12万)应用非常罕见。这主要是因为: (1) 当前市场上硅胶基质的高效离子交换键合相柱寿命普遍短, 重现性差; (2) 副作用(疏水相互作用)明显, 流动相中必须有有机溶剂。(3) 一般认为无法使用pH8以上。

    科学发明往往来自现实世界的挑战! 在基因工程大规模蛋白质药的分离纯化工艺优化过程中, 我们切身感受到以GE-Healthcare和Bio-Rad为代表的软胶柱效过低, 平衡和纯化时间太长, 许多瓶颈问题无法解决, 结果分离纯化成本高, 效率低。如果大规模高效离子交换色谱柱(柱效8-12万)可以代替传统软胶柱, 不仅是发酵产生的基因工程蛋白质药(纯化体系简单)还是自然界(纯化体系复杂) 天然蛋白质, 一个线性梯度纯化可能获得完全提纯的蛋白, 时间缩短了10倍。这一理想的高效离子交换色谱柱一定是硅胶基质的! 事实上, 生物下游工程(biological downstream engineering)的将来一定是以高品质硅胶基质的高效离子交换色谱柱和廉价的假亲合配基亲合色谱柱为纯化核心, 配合用于粗纯化的膨化床吸附和用于脱盐常规的凝胶体积排阻色谱。

    此外, 在蛋白质和多肽分析过程中, 客户反馈和我们切身感受到聚合物基质的高效离子交换色谱柱柱效低, 同时价格也非常昂贵。

    因此,我们系统地调查了为什么近几十年来硅胶基质的高效离子交换键合相产品质量没有取得质的突破的原因, 并且逐步的解决。最终我们发明了新型键合化学生产高品质硅胶基质的SCX, WCX, DEAE和SAX高效离子交换键合相。

    在这本产品手册中,我们正式推荐InnovationTM SCX高效强阳离子交换液相色谱柱(适合于小分子和多肽的应用) 和InnovationTM BioSCX高效强阳离子交换液相色谱柱(适合于多肽和蛋白质的应用)。我们相信它们是当前市场上唯一稳定, 柱寿命长, 重现性好的硅胶基质高效强阳离子交换液相色谱柱。

    InnovationTM SCX高效强阳离子交换液相色谱柱小分子应用请参阅我们的”Chrom-Matrix高效液相色谱柱产品手册及高效液相色谱柱实用方法学(小分子应用)" 产品手册。

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