Innovation TM Infinite C18反相色谱柱操作说明

简介

(1) Innovation TM Infinite C18 是我公司最新推出的能在pH1-12使用的C18；

(2) 高纯度B型球形硅胶骨架，重金属含量 <5ppm，具有高表面覆盖率，最大表面去活处理，离子交换活性以及与金属螯合作用降至最低；

(3) 硅胶表面使用真空沉积法覆盖单层有机聚合物，防止在高pH条件下硅胶溶解；

(4) 三功能高密度键合，其键合相非常稳定，非常可靠，LC-MS Q1检测无键合相泄漏，产品批次之间的差别小于5%；

(5) 超临界流体封端，最大程度消除硅醇基效应；

(6) 理论塔板数大于80000/m，极佳峰形；

(7) 极高稳定性，在pH 1~12条件下连续运行20000床体积，保留时间，柱效及峰形变化极小。

特征

应用

    绝大多数中性、酸性、两性和碱性化合物在Infinite C18上均能取得良好的分离。由于超临界流体封端最大程度消除硅醇基效应，碱性化合物会取得对称的峰形，不会拖尾。其独特的优势是能在极限pH条件下稳定使用。对于酸性和两性化合物，调流动相到pH 2~3左右质子化酸性官能团时可取得极佳峰形和良好分离。对于碱性化合物，调流动相到pH 1~3时可取得极佳峰形。但在许多情况下，也可将流动相pH调至8~12，让碱性化合物质子化。这个时候碱性化合物峰形明显对称。pH 1~2柱性能可能不如Ultimate C18，但在pH值9~12显示独特的优势。 

柱性能

Innovation TM Infinite C18色谱柱性能参数(柱效、拖尾因子、测试条件等)详见产品测试证书。

色谱柱安装和使用

旋下色谱柱两端柱头，按照色谱柱标签上液体流动方向将其连接于仪器。色谱柱不使用时，旋上两端柱头。

样品和流动相

为了避免堵塞色谱柱，样品和流动相使用前，须过0.45um滤膜、甚至孔径更小的滤膜。流动相为有机相和水相混合相，例如甲醇-水、乙腈-水。流动相脱气后方可使用。

操作注意点

承载溶剂：由于C18键合相为非极性相， 因此，流动相最好为甲醇-水、乙腈-水等混合相。一般情况，随着有机相比例的增加，样品的保留时间会缩短。梯度洗脱时，10%甲醇或乙腈常作为初始流动相，100%甲醇或乙腈常作为终点流动相。需要说明的是，C18键合相可以与大多数有机相兼容。对于新的色谱柱，柱内含有甲醇(或乙腈)和水混合相，因此，用户初次使用的流动相中不能含有与之反应的成分。应首先用60%左右甲醇冲洗色谱柱，以除去色谱柱在包装和运输过程中引入的杂质。然后使用目标流动相。如果柱压或基线出现波动，说明柱内有气泡，此时，应打开排气阀，同时把流速调至更高，并维持2~5min，以除去气泡，例如，对于250×4.6mm色谱柱，可将流速调至3mL/min。

pH：推荐pH使用范围为1~12。

温度：如果流动相黏度较高，可采用升高柱温的办法以提高分离效率。虽然最高操作温度为70oC，但是，为了更长的使用寿命，建议最佳操作温度为<50 oC，在温度高于70 oC下连续使用，可能损坏色谱柱，尤其是在pH>8或pH<2条件下，对色谱柱损坏更大。

流速：对于5um 250×4.6mm色谱柱，标准流速为1.0mL/min。

柱保护：为了防止流动相或样品中的杂质，在色谱柱之前最好安装一个保护柱或预柱。通常情况下，预柱能阻止来自于样品、流动相、泵或进样器的杂质，对色谱柱起到保护作用。

或

储存

当色谱柱长时间不使用时，色谱柱应储存在100%甲醇或乙腈中。如果流动相中含有缓冲盐，使用后，须使用50%甲醇-水或50%乙腈-水冲洗30min~60min。再用100%甲醇或乙腈冲洗30min~60min，保存。为了防止色谱柱床风干，两端应旋上柱堵头。

 应用说明

    Innovation TM Infinite C18可与Waters XBridge C18，Phenomenex Gemini-NX C18竞争，稳赢Agilent Zorbax Extend C18，Waters XTerra和Phenomenex Gemini C18。孔径：130Å；表面积：200m2/g；有机薄膜真空沉积在硅胶表面。这类产品pH适用范围1-12 (常规C18 pH适用范围2-8) 。这类产品真正独特的价值是在高pH，碱性小分子化合物中性状态因此峰形对称。但pH1-8值条件下，这类产品性能似乎不如Explorer C18，BetaBasic C18，Extreme C18，Ultimate C18，Premier C18等常规C18色谱柱。