Innovation TM Infusion C18反相色谱柱操作说明

简介

(1) Innovation TM极性嵌入式Infusion C18是C18高效反相液相色谱“卫星群”中最重要的产品，是C18和C8键合相最重要的补充。一些在C18和C8键合相上困难的分离可能在极性嵌入式(Polar embedded)键合相上获得很好的解决；

(2) 高纯度硅胶骨架，重金属含量 <5ppm，具有高表面覆盖率，最大表面去活处理，离子交换活性以及与金属螯合作用降至最低；

(3) 多功能高密度键合，LC-MS Q1检测无键合相泄漏，产品批次之间的差别小于2%；

(4) 在几乎所有的市场上能用在100％水相条件下的反相液相色谱产品中，Innovation TM Infusion最稳定，是新一代水相C18；

(5) 理论塔板数大于80000/m，极佳峰形；

(6) 极高稳定性，在pH 2~8条件下连续运行20000床体积，保留时间，柱效及峰形变化极小。

特征

应用

    应用范围非常广泛，绝大数化合物可获得对称峰形，中性、酸性、两性和碱性化合物在Infusion C18上均能取得良好的分离。对于酸性和两性化合物，调流动相到pH 2~3左右质子化酸性官能团时可取得极佳峰形和良好分离。对于碱性化合物，调流动相到pH 1~3时可取得极佳峰形。但在许多情况下，也可将流动相pH调至4~8甚至更高，以维持化合物稳定性或改变分离选择性。pH4~8时推荐使用10~100mM缓冲盐溶液。由于电荷屏蔽和极性相互作用，Infusion C18比市场上绝大多数中C18对碱性化合物峰形好。能在高水相比例、甚至是100%水相条件稳定使用。具有独特的分离选择性。

柱性能

Innovation TM Infusion C18 色谱柱性能参数 (柱效、拖尾因子、测试条件等) 详见产品测试证书。

色谱柱安装和使用

旋下色谱柱两端柱头，按照色谱柱标签上液体流动方向将其连接于仪器。色谱柱不使用时，旋上两端柱头。

样品和流动相

    为了避免堵塞色谱柱，样品和流动相使用前，须过0.45um滤膜、甚至孔径更小的滤膜。流动相可以是水相，或者是有机相和水相混合相，例如甲醇-水、乙腈-水。流动相脱气后方可使用。

操作注意点

承载溶剂：由于C18键合相为非极性相，因此，流动相最好为甲醇-水、乙腈-水等混合相。一般情况，随着有机相比例的增加，样品的保留时间会缩短。梯度洗脱时，0%甲醇或乙腈常作为初始流动相，100%甲醇或乙腈常作为终点流动相。需要说明的是，C18键合相可以与水相以及大多数有机相兼容。对于新的色谱柱，柱内含有甲醇(或乙腈)和水混合相，因此，用户初次使用的流动相中不能含有与之反应的成分。应首先用60%左右甲醇冲洗色谱柱，以除去色谱柱在包装和运输过程中引入的杂质。然后使用目标流动相。如果柱压或基线出现波动，说明柱内有气泡，此时，应打开排气阀，同时把流速调至更高，并维持2~5min，以除去气泡，例如，对于250×4.6mm色谱柱，可将流速调至3mL/min。

pH：推荐pH使用范围为2~8。

温度：如果流动相黏度较高，可采用升高柱温的办法以提高分离效率。虽然最高操作温度为70oC，但是，为了更长的使用寿命，建议最佳操作温度为<50oC，在温度高于70 oC下连续使用，可能损坏色谱柱，尤其是在pH>8或pH<2条件下，对色谱柱损坏更大。

流速：对于5um 250×4.6mm色谱柱，标准流速为1mL/min。

柱保护：为了防止流动相或样品中的杂质，在色谱柱之前最好安装一个保护柱或预柱。通常情况下，预柱能阻止来自于样品、流动相、泵或进样器的杂质，对色谱柱起到保护作用。

或

储存

    当色谱柱长时间不使用时，色谱柱应储存在100%甲醇或乙腈中。如果流动相中含有缓冲盐，使用后，须使用50%甲醇-水或50%乙腈-水冲洗30min~60min。再用100%甲醇或乙腈冲洗30min~60min，保存。为了防止色谱柱床风干，两端应旋上柱堵头。